上海分光光度計(jì)是一種廣泛應(yīng)用于化學(xué)、生物、醫(yī)藥等領(lǐng)域的分析儀器，用于測(cè)量物質(zhì)對(duì)不同波長(zhǎng)光的吸收或透射情況，從而進(jìn)行定性或定量分析。為了確保測(cè)量結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性，必須嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)流程進(jìn)行操作。
一、準(zhǔn)備工作
1.儀器準(zhǔn)備:
開機(jī)預(yù)熱：打開分光光度計(jì)電源，預(yù)熱至少30分鐘，使儀器達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)。
波長(zhǎng)校準(zhǔn)：使用標(biāo)準(zhǔn)波長(zhǎng)濾光片或溶液，按照儀器說明書進(jìn)行波長(zhǎng)校準(zhǔn)，確保波長(zhǎng)準(zhǔn)確性。
基線校準(zhǔn)：將空白溶液（通常為去離子水或溶劑）放入比色皿，放入樣品池，進(jìn)行基線校準(zhǔn)，消除儀器本身和溶劑的吸光度影響。
2.樣品準(zhǔn)備:
樣品處理：根據(jù)待測(cè)物質(zhì)的性質(zhì)和測(cè)量要求，對(duì)樣品進(jìn)行適當(dāng)?shù)念A(yù)處理，例如過濾、稀釋、萃取等，確保樣品清澈透明，無懸浮物或沉淀。
比色皿選擇：根據(jù)樣品量和測(cè)量波長(zhǎng)選擇合適的比色皿，常用的比色皿光程為1cm，材質(zhì)有玻璃和石英兩種，石英比色皿適用于紫外光區(qū)。
比色皿清洗：使用前用去離子水或溶劑清洗比色皿，并用擦鏡紙擦干，避免殘留物影響測(cè)量結(jié)果。
二、樣品測(cè)量
1.設(shè)置參數(shù):
波長(zhǎng)選擇：根據(jù)待測(cè)物質(zhì)的最大吸收波長(zhǎng)，設(shè)置分光光度計(jì)的測(cè)量波長(zhǎng)。
測(cè)量模式：選擇吸光度（Abs）或透射比（T%）模式，通常使用吸光度模式進(jìn)行定量分析。
掃描范圍：如果需要掃描樣品的吸收光譜，可以設(shè)置掃描的起始波長(zhǎng)和結(jié)束波長(zhǎng)。
2.樣品測(cè)量:
空白校正：將空白溶液放入比色皿，放入樣品池，按下“空白校正”鍵，儀器會(huì)自動(dòng)扣除空白溶液的吸光度。
樣品測(cè)量：將待測(cè)樣品溶液放入比色皿，放入樣品池，按下“測(cè)量”鍵，儀器會(huì)顯示樣品的吸光度或透射比。
重復(fù)測(cè)量：對(duì)于同一份樣品，建議重復(fù)測(cè)量2-3次，取平均值作為最終結(jié)果，提高測(cè)量精度。
三、數(shù)據(jù)處理
1.數(shù)據(jù)記錄:記錄測(cè)量得到的吸光度或透射比數(shù)據(jù)，以及對(duì)應(yīng)的樣品信息、測(cè)量條件等。
2.數(shù)據(jù)分析:根據(jù)測(cè)量數(shù)據(jù)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線或進(jìn)行其他數(shù)據(jù)分析，計(jì)算待測(cè)物質(zhì)的濃度或含量。
3.結(jié)果報(bào)告:撰寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告，包括實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、原理、步驟、結(jié)果、討論等內(nèi)容，并對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析和解釋。
四、注意事項(xiàng)
比色皿的透光面要保持清潔，避免用手直接觸摸。
樣品溶液的濃度要適中，吸光度值最好在0.2-0.8之間，超出此范圍會(huì)影響測(cè)量精度。
測(cè)量過程中要避免震動(dòng)和強(qiáng)光直射，以免影響測(cè)量結(jié)果。
儀器使用完畢后，要及時(shí)關(guān)閉電源，清洗比色皿，并做好儀器的清潔和維護(hù)工作。
